Pembuatan Media Nutrient Agar (NA) Dan Uji Sterilitas

By: Bu Amel

TUJUAN:

1.        Membuat media NA

2.        Uji sterilitas media NA

 

PROSEDUR PRAKTIKUM:

A.       Pembuatan larutan nutrien agar (NA):

1.      Timbanglah NA sebanyak 1,2 gram (cek pada kemasan) dan dimasukkan ke dalam Erlenmeyer.

2.      Tambahkan 50 mL akuades.

3.      Panaskan diatas nyala api sambil diaduk sampai dengan homogen (larutan jernih kekuningan), tidak boleh sampai mendidih.

4.      Tutup Erlenmeyer dengan kapas, bungkus dengan kertas dan ikat dengan karet.

5.      Siap disterilisasi

 

B.        Netralisasi larutan NA

1.      Larutan NA yang telah dibuat, dicek pH nya mengguanakan indikator universal atau pH meter

2.      Apabila larutan NA memiliki pH kurang dari 7 maka larutan NA ditambah sedikit demi sedikit dengan larutan NaOH 0.1 N sampai netral (pH = 7) tetapi, jika larutan NA memiliki pH lebih dari 7 ditambahkan dnegan HCl 0.1 N sampai netral (pH = 7).

 

C.        Sterilisasi alat dan larutan media NA

1.      Bungkus semua alat yang akan disterilkan dengan kertas

2.      Sterilisasi alat dan media menggunakan autoklaf bersama dengan cawan petri dan tabung reaksi yang telah dibungkus juga pada suhu 121 oC tekanan 1 atm selama 15 menit.

3.      Secara aseptis, tuanglah media NA ke dalam cawan petri dan tabung reaksi yang telah disterilkan.

4.      Letakkan cawan petri pada tempat yang datar dan miringkan tabung reaksi (agar miring) sampai memadat.

 

D.       Uji sterilitas

1.      Keluarkan alat dan media yang telah disterilisasi

2.      Masukkan ke dalam incubator selama 2x24 jam.

3.      Amati hasilnya (steril/ kontaminasi)

 

 

Apa prosedur ini cukup jelas untuk kamu?

Tulis pertanyaan yang belum kamu pahami,  atau pengalamanmu memahami prosedur ini di kolom komentar yaa...